PH值是一個無量級數，用來測量水溶液的酸堿性。它被定義為氫離子濃度的負十進制對數。酸或堿的強度由顏色指標來確定。

    每個細胞過程都有一個理想的PH值，在這個PH值下細胞的功能最佳。如果這個過程偏離了這個理想的PH值，就會導致構象酶的變化，從而損害身體功能，所以需要在高低溫試驗箱測試這個正確的PH值從低溫到高溫的最佳匹配值以及從高溫到低溫的最佳匹配值。如果進程大大偏離了理想的PH值,它甚至可以破壞DNA的二級結構導致不可逆的變性就像人的皮膚被高溫灼燒一樣會留下不可恢復的傷痕。

    為了使細胞生長良好，在經過高低溫試驗箱的測試，并測試出最佳的細胞溫度以后這需要高性能的恒溫恒濕培養基，因為PH值必須穩定。大多數哺乳動物的細胞在PH值為7.4時感覺很舒服。轉化后的細胞PH值較低，在7.0到7.4之間，正常成纖維細胞PH值較低，在7.4到7.7之間。

許多培養基中都添加了酚紅PH指示劑。PH值為7.4時，培養基呈紅色。酚紅的媒介改變顏色,當pH值上升,將粉紅色的pH值7.6和紫色為7.8。這可能意味著培養基被酵母或真菌污染。隨著PH值變得越來越酸，指示劑從橙色變為黃色——這可能是細菌污染的跡象。

    高低溫試驗箱孵育箱在每個細胞和組織培養實驗室的活動中發揮著關鍵作用——從生長粘附的CHO細胞培養液到在系統的幫助下用于基因組編輯的生長培養液。

大多數情況下，在培養基中使用的是開放式碳酸氫鹽緩沖體系。

該緩沖系統通過培養箱大氣中所含二氧化碳與培養基中釋放的二氧化碳之間的交換來維持平衡。